熒光PCR檢測試劑盒是一種基于聚合酶鏈式反應(PCR)結(jié)合熒光標記技術(shù)的分子生物學工具,廣泛應用于基因定量分析、病原體檢測等領(lǐng)域。以下是其核心作用及儲存條件的詳細說明:
1. 高靈敏度的目標核酸定量
原理:利用Taq DNA聚合酶在擴增過程中釋放的熒光信號強度與模板DNA含量成正比的關(guān)系,實現(xiàn)對特定基因片段的實時動態(tài)檢測。可檢測低至單拷貝水平的核酸分子。
應用場景:
病毒載量測定;
腫瘤標志物微小殘留病灶監(jiān)測;
轉(zhuǎn)基因成分篩查(GMO檢測)。
2. 多重靶標同步鑒別能力
通過設計不同熒光通道的探針或引物組合,可在同一反應體系中區(qū)分多種目標序列。例如:
呼吸道合胞病毒/腺病毒/流感病毒聯(lián)合檢測;
SNP基因分型用于藥物代謝相關(guān)多態(tài)性分析。
3. 封閉體系降低污染風險
采用預混液形式提供所有必需組分,減少移液步驟帶來的交叉污染概率。配合帶濾芯的槍頭使用,可將氣溶膠污染率控制在0.1%以下。
4. 自動化兼容與標準化輸出
適配主流qPCR儀器,內(nèi)置ROX校正染料自動扣除背景干擾。配套軟件支持熔解曲線分析、標準曲線繪制等功能,確保結(jié)果可重復性CV值<5%。
二、熒光PCR檢測試劑盒儲存特殊注意事項:
光敏感性防護:熒光染料見光易淬滅,需使用不透明鋁箔袋包裝并儲存于暗處。實驗操作應在弱紅光照明下進行。
熱穩(wěn)定性限制:某些熱啟動聚合酶制劑在室溫放置超過4小時后活性下降超20%,必須嚴格遵循“用多少取多少”原則。
磁珠法提取試劑兼容性:若配套核酸提取步驟,需驗證磁珠與試劑盒緩沖液的離子強度匹配度,防止結(jié)合效率下降。
