原代細(xì)胞培養(yǎng)的主要注意事項(xiàng)
更新時(shí)間：2024-10-22 點(diǎn)擊次數(shù)：458
原代小梁網(wǎng)細(xì)胞培養(yǎng)體系是一個(gè)為體外生長(zhǎng)的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動(dòng)物的小梁網(wǎng)細(xì)胞設(shè)計(jì)的理想的完培方案。本體系是一個(gè)基于碳酸氫鹽的緩沖體系，可以在孵育的5%的CO2的氣體環(huán)境下維持一個(gè)圍繞pH7.2的酸堿緩沖體系。本體系是一個(gè)無(wú)菌的液體混合系統(tǒng)，其中包含必須和非必須氨基酸、維生素、激素、生長(zhǎng)因子、微量元素和一些其他的有機(jī)和無(wú)機(jī)化合物以及胎牛血清（10%）。本培養(yǎng)體系是基于固定配方配制的液態(tài)培養(yǎng)體系，可以為體外培養(yǎng)的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動(dòng)物的小梁網(wǎng)細(xì)胞提供一個(gè)確定適宜的平衡營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，并且可以選擇性的促進(jìn)小梁網(wǎng)細(xì)胞的擴(kuò)增。
注意事項(xiàng)：
1、組織塊培養(yǎng)法：
（1）剛接種后，組織塊粘附不牢固，觀察和轉(zhuǎn)移過(guò)程中動(dòng)作要輕，以防引起液體振蕩，使組織塊漂起
（2）培養(yǎng)初期，要注意觀察有無(wú)細(xì)菌、霉菌污染
（3）原代培養(yǎng)要及時(shí)觀察，記錄
（4）過(guò)3-5天，需要換液以除去漂浮組織塊和殘留的血細(xì)胞，保證原代細(xì)胞正常生長(zhǎng)
2、消化培養(yǎng)法：某些特殊類(lèi)型細(xì)胞如內(nèi)皮細(xì)胞需用特殊的消化手段和步驟進(jìn)行
3、器官培養(yǎng)和組織塊培養(yǎng)類(lèi)似
4、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法：注意調(diào)整細(xì)胞濃度
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